הקרדינל קרל שְׁמִידְט נרצח במקום הניטרלי והבטוח ביותר בעולם, קריית הוותיקן, והעולם הנוצרי כמרקחה: אף אחד לא חש מוגן בתוככי הוותיקן כל עוד הרוצח האכזרי מסתובב חופשי. משטרת הוותיקן אינה מוצאת את ידיה ואת רגליה בחקירה, ותחנת משטרת וִיָה וֵנֵטוֹ נקראת לעזרה. מפקד התחנה ריקרדו לוֹמבַּרְדי והבלשית קתרין סמית יוצאים למרדף אחרי הרוצח החמקמק, שבמהלכו נחשפים אמיתות ושקרים על חייו המסתוריים של הקרדינל. העניינים מסתבכים עוד יותר, כאשר מתגלה שגם לאנשי הדת הבכירים שסבבו אותו, יש מה להסתיר.

קתרין מגייסת לעזרתה את הרוזן המסתורי אנטוניו דֵלָה טוֹרֶה, גבר קודר בעל פנים רבות ואישיות אפלה ומתעתעת, על מנת להתחקות על עקבותיו של הרוצח הערמומי ולגלות מה באמת מתרחש בין כותלי הוותיקן.

כשאדם מסתורי פונה אל אנטוניו בבקשת עזרה בלתי צפויה, אנטוניו מוצא את עצמו בתפקיד של סוכן כפול. הפרשה הולכת ומסתבכת, ועוד ועוד תככים וסודות נחשפים, טפח אחר טפח, במרתפי הוותיקן.

לילה אחד בוותיקן הוא ספרה השני של ד"ר סיון קיש (M.D), בוגרת לימודי רפואה ברומא, שספרה הראשון "שדות נלוזים" קצר תשבחות רבות והפך לרב־מכר.